Bộ dụng cụ khai thác axit nucleic nhanh cho vi khuẩn, nấm và mycoplasma | 40 phút | Tế bào yocon

• Khả năng tương thích rộng: Được thiết kế để chiết xuất một bước tương thích với bộ dụng cụ phát hiện vi khuẩn, nấm và mycoplasma, cho phép chức năng ba để thử nghiệm vô trùng.

  
  

• Độ nhạy cao: Khi được kết hợp với bộ phát hiện mycoplasma của chúng tôi, đạt được các giới hạn phát hiện dưới 10 CFU/ml.

• Thành phần đơn giản hóa: Hợp nhất nhiều thành phần ly giải thành hai thuốc thử được sắp xếp hợp lý (đệm chiết axit nucleic 1 & 2), giảm thiểu các bước vận hành và rủi ro ô nhiễm trong quá trình chiết xuất.

• Quy trình công việc nhanh chóng: Quá trình ba bước hoàn thành chiết xuất axit nucleic trong vòng dưới 40 phút, lý tưởng cho các ứng dụng thông lượng cao.

• Kiểm soát ô nhiễm: Gói mở rộng tùy chọn loại bỏ nhiễu, đảm bảo phát hiện độc quyền các vi sinh vật khả thi.

• Xử lý mẫu mạnh mẽ: Xử lý các mẫu đa dạng, từ huyền phù vi khuẩn đơn giản đến hỗn hợp nuôi cấy tế bào phức tạp (ví dụ: MSC, NK, HEK293 tế bào). Hỗ trợ lên đến 5 × 10⁷ tế bào/mL trong các chế phẩm tế bào.

• Hiệu suất chiết xuất vượt trội: Phương pháp ly giải nhiệt giúp loại bỏ sự phụ thuộc vào các hạt từ tính hoặc các hệ thống dựa trên cột, đạt được sản lượng axit nucleic cao hơn.

Q: Làm thế nào để tránh dương tính giả trong quá trình phát hiện?

Trả lời: Đầu tiên, thực hiện kiểm soát môi trường để ngăn ngừa ô nhiễm vi khuẩn hoặc axit nucleic trong khu vực hoạt động. Lý tưởng nhất, đảm bảo phòng khai thác không có ô nhiễm vi khuẩn và axit nucleic, và tất cả các công việc hoạt động phải vô trùng và không có các mảnh axit nucleic. Thứ hai, tất cả các nguồn hàng thí nghiệm được sử dụng phải vô trùng và không có các mảnh axit nucleic; Nếu không chắc chắn, autoclave chúng trước khi sử dụng. Cuối cùng, các nhà khai thác phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy trình vô trùng trong suốt quá trình, từ lấy mẫu đến chiết xuất đến chuẩn bị hệ thống phát hiện, để tránh đưa ra ô nhiễm do xử lý không đúng cách.

Q: Kết tủa trắng ở dưới cùng của ống sau khi ly tâm, nó có ảnh hưởng đến việc chiết không?

A: Sự hiện diện của kết tủa trắng thường có hai nguyên nhân có thể:

1. Ô nhiễm vi khuẩn đáng kể trong mẫu, trong đó một lượng lớn vi khuẩn tạo thành một viên có thể nhìn thấy sau khi ly tâm.

2. Các mảnh vụn tế bào còn lại trong hỗn hợp nuôi cấy tế bào hoặc chuẩn bị tế bào, vẫn còn sau các quy trình loại bỏ tế bào tiêu chuẩn và lắng xuống ở phía dưới trong quá trình ly tâm.

   Cả hai kịch bản đều bình thường và không ảnh hưởng đến kết quả trích xuất.

H: Tại sao tham chiếu nội bộ không khuếch đại sau khi chiết axit nucleic và làm thế nào để giải quyết nó?

Trả lời: Có hai lý do tiềm năng cho tham chiếu nội bộ không khuếch đại:

1. 
   

   Tải trọng vi khuẩn quá mức: Cường độ huỳnh quang của kênh gen đích quá mạnh, ngăn chặn phản ứng huỳnh quang của kênh tham chiếu bên trong. Điều này không ảnh hưởng đến giải thích kết quả.

2. 
   

   Các mẫu phức tạp với các chất ức chế còn lại: dung dịch axit nucleic chứa mức độ cao của các chất ức chế.

   Để giải quyết vấn đề này, pha loãng dung dịch axit nucleic 2 trận10 × với nước tinh khiết áp suất cao trước khi tải nó vào phản ứng PCR.