Số Duyệt:0 CỦA:trang web biên tập đăng: 2025-05-21 Nguồn:Site
Nền nghiên cứu và phát triển nền
Trong những năm gần đây, với việc thăm dò độ sâu của liệu pháp miễn dịch, các tế bào γδT đã dần dần trở nên nổi bật. Là một tập hợp tế bào T - tế bào truyền thống, các tế bào γΔT nhận ra các kháng nguyên thông qua một phức hợp tương thích mô học chính (MHC) - con đường độc lập, do đó có những lợi thế độc đáo trong liệu pháp miễn dịch ung thư. Một số lượng lớn các nghiên cứu đã chỉ ra rằng các tế bào γδT có khả năng tiêu diệt mạnh mẽ chống lại các tế bào khối u tự trị, allogeneic hoặc xenogeneic và nồng độ của chúng thường liên quan chặt chẽ đến tiên lượng lâm sàng của bệnh nhân.
Tuy nhiên, các phương pháp nuôi cấy tế bào γδT hiện tại khó có thể đáp ứng các yêu cầu lâm sàng đối với các tế bào effector độ tinh khiết và độ cao cao. Các phương pháp để mở rộng vitro của các tế bào γΔT có thể được chia thành hai phương pháp: các phương pháp dựa trên dòng tế bào nạp K562 và các phương pháp dựa trên bisphosphonates. Trong số đó, phương pháp mở rộng dựa trên dòng tế bào trung chuyển đòi hỏi phải giới thiệu các tế bào khối u, có rủi ro an toàn tiềm năng và các yêu cầu kiểm soát chất lượng nghiêm ngặt, gây ra một số lo ngại trong các ứng dụng lâm sàng. Phương pháp mở rộng dựa trên bisphosphonates thường không đạt được bội số mở rộng cao và sẽ ảnh hưởng đến khả năng tồn tại của tế bào trong giai đoạn sau.
Dựa trên điều này, Yocon Biotech, dựa vào nhiều năm kinh nghiệm thành công trong lĩnh vực tế bào miễn dịch, đã phát triển bộ dụng cụ mở rộng và cảm ứng tế bào γδT. Được kết hợp với môi trường cơ bản NK5.0 mới được nâng cấp, nó tăng cường đáng kể khả năng mở rộng liên tục của các tế bào, với độ tinh khiết cao và tỷ lệ tích cực cao, đáp ứng nhu cầu của nghiên cứu lâm sàng.
Mẫu giới thiệu sản phẩm
tảng tế bào và bộ mở rộng tế bào
● Nó được sử dụng để tạo ra và mở rộng các tế bào đơn nhân máu ngoại vi và lạnh lạnh của con người (PBMC) thành các tế bào γδT trong ống nghiệm. Sau 14 - 16 ngày nuôi cấy, PBMC có thể đạt được sự mở rộng tế bào hơn 200 - gấp với tỷ lệ dương hơn 85%.
● gây ra bởi các yếu tố thuần túy mà không có tế bào lớp trung chuyển. Phương pháp nuôi cấy rất đơn giản và dễ vận hành, và trạng thái tế bào về cơ bản là đồng đều. Bổ sung môi trường theo quy trình được đề xuất mà không cần phải đếm tế bào.
● Kết hợp với môi trường cơ bản NK5.0 mới được nâng cấp, nó tăng cường đáng kể khả năng mở rộng liên tục của các tế bào.
Hiệu suất sản phẩm
◆ Trạng thái tế bào
◆
Mẫu 1: Mẫu tế bào đơn nhân máu ngoại vi tươi từ một con đực khỏe mạnh 25 tuổi. Được cấy với tổng số tế bào 4 × 10⁷, sau 14 ngày nuôi cấy, 9 tỷ tế bào đã được thu hoạch với tỷ lệ dương là 90,01%.
Mẫu 2: Mẫu tế bào đơn nhân máu ngoại vi được bảo tồn từ một người đàn ông khỏe mạnh 35 tuổi. Được tiêm với tổng số tế bào 4 × 10⁷, sau 14 ngày nuôi cấy, 8.2 tỷ tế bào đã được thu hoạch với tỷ lệ dương là 90,29%.
Mẫu 3: Mẫu tế bào đơn nhân máu ngoại vi được bảo tồn từ một người đàn ông khỏe mạnh 27 tuổi. Được tiêm với tổng số tế bào 4 × 10⁷, sau 14 ngày nuôi cấy, 7 tỷ tế bào đã được thu hoạch với tỷ lệ dương là 83,51%.
4: Mẫu tế bào đơn nhân máu ngoại vi tươi từ một người đàn ông khỏe mạnh 38 tuổi. Được tiêm với tổng số tế bào 4 × 10⁷, sau 14 ngày nuôi cấy, 8,1 tỷ tế bào đã được thu hoạch với tỷ lệ dương là 92,66%.
Mẫu 5: Mẫu tế bào đơn nhân máu ngoại vi tươi từ một người đàn ông khỏe mạnh 27 tuổi. Được cấy với tổng số tế bào 6 × 10⁷, sau 14 ngày nuôi cấy, 8,36 tỷ tế bào đã được thu hoạch với tỷ lệ dương là 89,98%.
◆ Xét nghiệm độc tế bào
Mẫu 1: Mẫu máu ngoại vi tươi. Sau 14 ngày nuôi cấy, tỷ lệ dương của các tế bào γΔT là 90,97%.
Một xét nghiệm độc tế bào khối u đã được thực hiện bởi CO - ủ với các tế bào K562 trong 20 giờ. Tốc độ tiêu diệt K562 = (số lượng tế bào K562 được tiêm - số lượng tế bào K562 còn lại sau 20 - giờ ủ) / số lượng tế bào K562 được tiêm. Khi tỷ lệ hiệu ứng - đến - mục tiêu là 20: 1, hiệu quả tiêu diệt là khoảng 56%; Khi tỷ lệ hiệu ứng - đến - mục tiêu là 40: 1, hiệu quả tiêu diệt là khoảng 87%, thể hiện khả năng tiêu diệt khối u tốt của nó.
Kiểm tra độc tính tế bào biểu hiện trường hợp của các tế bào γδT được nuôi cấy từ máu ngoại vi
Mẫu 2: Mẫu máu cuống rốn tươi. Sau 14 ngày nuôi cấy, tỷ lệ dương tính của các tế bào γδT là 79,44%.
Một xét nghiệm độc tế bào khối u đã được thực hiện bởi CO - ủ với các tế bào K562 trong 20 giờ. Khi tỷ lệ hiệu ứng - đến - mục tiêu là 20: 1, tỷ lệ tiêu diệt là khoảng 64%; Khi tỷ lệ hiệu ứng - đến - mục tiêu là 40: 1, tỷ lệ tiêu diệt là khoảng 93%. Điều này chỉ ra rằng các tế bào γδT được nuôi cấy từ máu cuống rốn bằng cách sử dụng bộ dụng cụ này cũng có độc tính tế bào tuyệt vời.
Thử nghiệm độc tế bào của các tế bào γδT được nuôi cấy từ máu cuống rốn